Analýzy kanabinoidů - srovnávací studie

Srovnávací studie obsahu kanabinoidu

CBD dle vzorku samičí rostliny konopí k analytickému měření

VZOREK č. 1 – samičí květ (cannabis flos)

Množství zpracovávané rostlinné sušiny			2,744 g
Množství získaného ethanolického extraktu po oddestilování EtOH			0,30 g
Koncentrace kanabinoidních látek v 1 g EtOH extraktu	CBD	THC	CBN
	279 mg/g = 27,90%	23,67mg/g = 2,37%	0,18 mg/g = 0,018%
Koncentrace kanabinoidních látek v 1 g rost. sušiny	CBD	THC	CBN
	30,50 mg/g = 3,05%	2,59 mg/g = 0,26%	0,020 mg/g = 0,002%

VZOREK č. 2 –  plodonosný samičí vrcholík (cannabis herba)

Množství zpracovávané rostlinné sušiny			142 g
Množství získaného ethanolického extraktu po oddestilování EtOH			10.20 g
Koncentrace kanabinoidních látek v 1 g EtOH extraktu	CBD	THC	CBN
	155 mg/g = 15,50%	16,1 mg/g = 1,61%	0,49 mg/g = 0,049%
Koncentrace kanabinoidních látek v 1 g rost. sušiny	CBD	THC	CBN
	11,12 mg/g = 1,11%	1,16 mg/g = 0,12%	0,035 mg/g = 0,0035%

VZOREK č. 3 – celá nadzemní část samičí rostliny (tzn. vrcholíky, větvičky, semena a stonek bez kořene)

Množství zpracovávané rostlinné sušiny			150 g
Množství získaného ethanolického extraktu po oddestilování EtOH			3.0 g
Koncentrace kanabinoidních látek v 1 g EtOH extraktu	CBD	THC	CBN
	137 mg/g = 13,70%	9,93 mg/g = 0,99%	0,70 mg/g = 0,07%
Koncentrace kanabinoidních látek v 1 g rost. sušiny	CBD	THC	CBN
	2,73 mg/g = 0,27%	0,19 mg/g = 0,02%	0,014 mg/g = 0,0014%

VZOREK č. 4 – celá nadzemní část samičí rostliny (tzn. vrcholíky, větvičky, semena a stonek bez kořene)

Množství zpracovávané rostlinné sušiny (briketa)			150 g
Množství získaného ethanolického extraktu po oddestilování EtOH			4.6 g
Koncentrace kanabinoidních látek v 1 g EtOH extraktu	CBD	THC	CBN
	76 mg/g = 7,60%	3,79 mg/g = 0,38%	0,43 mg/g = 0,043%
Koncentrace kanabinoidních látek v 1 g rost. sušiny	CBD	THC	CBN
	2,30 mg/g = 0,23%	0,11 mg/g = 0,01%	0,013 mg/g = 0,0013%

VZOREK č. 5 - celá nadzemní část samičí rostliny (tzn. vrcholíky, větvičky, semena a stonek bez kořene)

Množství zpracovávané rostlinné sušiny			150 g
Množství získaného ethanolického extraktu po oddestilování EtOH			2.8 g
Koncentrace kanabinoidních látek v 1 g EtOH extraktu	CBD	THC	CBN
	114 mg/g = 11,40%	5,38 mg/g = 0,54%	0,70 mg/g = 0,07%
Koncentrace kanabinoidních látek v 1 g rost. sušiny	CBD	THC	CBN
	2,13 mg/g = 0,21%	0,10 mg/g = 0,01%	0,012 mg/g = 0,0012%

doc. RNDr. Peter Ondra, CSc.

znalec v oboru zdravotnictví

odvětví toxikologie

Hněvotínská 3

775 09 Olomouc

Open Royal Academy

Cannabis is The Cure, z.s.

Dušan D v o ř á k, MMCA

Tylova 963/2

779 00 O L O M O U C

Tox 1930/2015

Průkaz a stanovení kanabinoidních látek v rostlinném matriálu - chemické toxikologické vyšetření - znalecký posudek

K Vaší žádosti doručené  dne 10.11.2015 v nadepsané věci  shora uvedené spisové značky podávám následující

n á l e z :

Dušan Dvořák, MMCA objednává u Ústavu soudního lékařství FN Olomouc analýzu jednoho rostlinného vzorku se zaměřením na hlavní kanabinoidní látky, konkrétně na kanabidiol (CBD), delta - 9 - tetrahydrokanabinol (THC) a kanabinol (CBN).

 

Chemické toxikologické vyšetření:

Materiál dodaný k vyšetření:   

Jedna cca 40 cm dlouhá větvička dle zadavatele se samičími květy v suchém stavu. Větvička neobsahovala žádný list, ten však nebyl odstraněn. Květy byly z větvičky (vrcholíku) před homogenizací květu odstraněny a samostatně zváženy. Samičí květy (cannabis flos) vážily 2,744 gramů. Samčí květy dodány nebyly. 

 

Vlastní vyšetření:

Vyšetření bylo zaměřeno  na průkaz  toxikologicky významných  látek  v dodaném vzorku se zaměřením na kanabinoidy, konkrétně na CBD, THC a CBN.

Extrakce kanabinoidních látek z dodaného rostlinného materiálu:

1)      Rostlinný vzorek  v množství 2,744 g  byl homogenizován  

2)      Na 1 g rostlinné sušiny bylo k extrakci použito 10 ml EtOH 96%

3)       3 minuty ručně promícháno, 2 minuty vortexováno a 5 minut mícháno na míchačce a 3 x 5 min. sonifikováno

4)      Dekantace a filtrace vzorku

5)      Odpaření vzorku  na keramických odpařovacích miskách do medovité konzistence

6)      Zisk ethanolického extraktu, který byl zvážen a použit k další analýze

Analýza ethanolického extraktu:

10 mg z  ethanolického extraktu   bylo rozpuštěno v 1 ml ethanolu (EtOH) a naředěno opět ethanolem na předpokládané koncentrace, které by byly vhodné k další analýze. Takto připravený vzorek byl následně analyzován metodou plynové chromatografie s hmotnostním spektrometrem (GC-MS) na přístroji TRACE GC POLARIS Q firmy Thermo Finnigan, který byl vybavený kapilární kolonou firmy Thermo Scientific TG 5 MS (15m x 0.25 um x 0.25 mm) s použitím teplotního programu 70°C (1 minuta) – nárůst 15°C do 260°C  (isoterma 3 minuty). Uvedenou metodou byla v ethanolickém roztoku z dodaného vzorku prokázána přítomnost hlavních obsahových látek rostlin konopného typu -  kanabidiolu (CBD), delta – 9 - tetrahydrokanabinolu (THC) a kanabinolu (CBN). Metodou GC-MS bylo provedeno stanovení koncentrace všech tří identifikovaných látek.

Rostlinný vzorek  

Množství zpracovávané rostlinné sušiny			2,744 g
Množství získaného ethanolického extraktu po oddestilování EtOH			0,30 g
Koncentrace kanabinoidních látek v 1 g EtOH extraktu	CBD	THC	CBN
	279 mg/g = 27,90%	23,67mg/g = 2,37%	0,18 mg/g = 0,018%
Koncentrace kanabinoidních látek v 1 g rost. sušiny	CBD	THC	CBN
	30,50 mg/g = 3,05%	2,59 mg/g = 0,26%	0,020 mg/g = 0,002%

Na základě shora uvedeného nálezu podávám  k položeným  otázkám:

1)                  Proveďte kvalitativní a kvantitativní zkoumání   rostlinného vzorku na přítomnost kanabidiolu, delta - 9 – tetrahydrokanabinolu a kanabinolu.  

2)                  Uveďte další skutečnosti důležité pro objektivní posouzení věci.

tento znalecký

posudek:

1)         Provedeným toxikologickým vyšetřením  dodaného rostlinného vzorku byla  v tomto vzorku prokázána  přítomnost hlavních obsahových látek rostlin konopného typu -  kanabidiolu (CBD), delta – 9 - tetrahydrokanabinolu (THC) a kanabinolu (CBN). Metodou GC-MS bylo provedeno stanovení koncentrace všech tří identifikovaných látek v analyzovaném vzorku s následujícími výsledky (zokrouhleno):

Koncentrace kanabinoidních látek v 1 g rost. sušiny	CBD	THC	CBN
	30,50 mg/g = 3,05%	2,59 mg/g = 0,26%	0,020 mg/g = 0,002%

2)         V době zpracování tohoto posudku nemá podepsaný znalec žádné další skutečnosti či poznatky,  které by pro posouzení předmětné věci mohly být důležité.

Poznámka: Materiál dodaný k chemickému toxikologickému vyšetření bude uložen na pracovišti ÚSLaMP v Olomouci po dobu jednoho měsíce od předání znaleckého posudku.  Za předpokladu, že nebude v tomto termínu  dožadatelem vyzvednut, bude zlikvidován. 

                                                     

V Olomouci 27.11.2015                                                         doc.  RNDr. Peter Ondra, CSc.