Ústřední kontrolní a zkušební orgán zemědělský ČR dle zákona 106/1999 Sb. odpověděl, jak se měří THC v konopí (zde odpověď) a odkázal na tento věstník EU
2.12.2009 CS Úřední věstník Evropské unie L 316/105 - 107
2.12.2009 CS Úřední věstník Evropské unie L 316/105 - 107
PŘÍLOHA I
Metoda společenství pro kvantitativní určení obsahu
delta-9-tetrahydrokannabinolu v odrůdách konopí
1. Rozsah a oblast použití
Tato metoda slouží k určení obsahu delta-9-tetrahydrokannabinolu
(dále jen „THC“) v odrůdách konopí (Cannabis
sativa L.).
Podle potřeby je uplatňována podle postupu A nebo B,
které jsou zde popsány.
Metoda je založena na kvantitativním určení
delta-9-THC pomocí plynové chromatografie (GC) po extrakci vhodným rozpouštědlem.
1.1. Postup
A
Postup A se používá pro kontroly produkce podle článku
39 nařízení (ES) č. 73/2009 a čl. 30 odst. 2 písm. a) tohoto nařízení.
1.2. Postup
B
Postup B se používá v případech, které jsou uvedeny
v čl. 39 odst. 1 nařízení (ES) č. 73/2009 a v čl. 40 odst. 3 tohoto nařízení.
2. Odběr vzorků
2.1. Vzorky
Postup A: z porostu dané odrůdy konopí se odebere z každé
vybrané rostliny část dlouhá 30
cm, která obsahuje nejméně jedno samičí květenství.
Odběr vzorků se provádí v období, které začíná 20.
den po rozkvětu a končí 10. den po odkvětu, během dne a při dodržení
systematického postupu, který zajišťuje reprezentativnost vzorků pro dané pole,
avšak s výjimkou okrajů porostu.
Členské státy mohou povolit odběr vzorků v období od
rozkvětu do 20. dne po rozkvětu za předpokladu, že u každé pěstované odrůdy se
odeberou další reprezentativní vzorky v souladu s prvním pododstavcem v období
od 20. dne po rozkvětu do 10. dne po odkvětu.
Postup B: z porostu dané odrůdy konopí se odebere horní třetina
každé vybrané rostliny.
Odběr vzorků se provádí v průběhu 10 dnů po odkvětu,
během dne a při dodržení systematického postupu, který zajišťuje
reprezentativnost vzorků pro dané pole, avšak s výjimkou okrajů porostu. V případě
dvoudomých odrůd se odebírají pouze samičí rostliny.
2.2. Velikost
vzorku
Postup A: vzorek je tvořen částmi 50 rostlin na
jedno pole.
Postup B: vzorek je tvořen částmi 200 rostlin na
jedno pole.
Každý vzorek se umístí do plátěného nebo papírového
pytle tak, aby se nerozdrtil, a zašle se do laboratoře k analýze.
Členské státy mohou stanovit, že se odebírá druhý
vzorek pro případnou kontrolní analýzu, který uschová buď producent, nebo
subjekt odpovědný za analýzu.
2.3. Sušení
a skladování vzorků
Sušení vzorků musí začít co nejdříve, v každém případě
do 48 hodin a používá se jakákoli metoda s teplotou nižší než 70 °C.
Vzorky se usuší tak, aby měly stálou hmotnost a obsah vody mezi
8 % a 13 %.
Po vysušení se vzorky bez rozdrcení uskladní v temnu při teplotě
do 25 °C.
3. Stanovení obsahu THC
3.1. Příprava zkušebního
vzorku
Z vysušených vzorků se odstraní stonky a semena větší než 2 mm.
Vysušené vzorky se rozdrtí na středně jemný prášek (skrze síto s
oky o velikosti 1 mm).
Prášek lze skladovat 10 týdnů v temnu a suchu při teplotě do 25 °C.
3.2. Činidla a extrakční
roztok
Činidla
-
delta-9-tetrahydrokannabinol, čistý pro chromatografické účely,
-
skvalen, čistý pro chromatografické účely, jako vnitřní
standardní vzorek.
Extrakční roztok 35 mg skvalenu na 100 ml hexanu.
3.3. Extrakce
delta-9-THC
Odváží se 100 mg zkušebního vzorku rozmělněného na prášek, umístí
se do odstředivkové zkumavky a přidá se 5 ml extrakčního roztoku obsahujícího
vnitřní standardní vzorek.
Vzorek se umístí do ultrazvukové lázně a ponechá se zde 20
minut. Pět minut se odstřeďuje při 3 000 otáčkách za minutu a pak se odebere
roztok THC plovoucí na povrchu. Tento roztok se vstříkne do chromatografu a
provede se kvantitativní analýza.
3.4. Plynová
chromatografie
a) Přístroje
- plynový chromatograf s plamenovým ionizačním detektorem a děleným/neděleným
vstřikovačem,
- kolona umožňující dobré oddělení kanabinoidů, například skleněná
kapilární kolona dlouhá 25 m,
o průměru 0,22 mm,
potažená 5 % nepolární fenylmethylsiloxanovou fází.
b) Rozsahy kalibrace
Přinejmenším tři body pro postup A a pět bodů pro postup B, včetně
bodů 0,04 a
0,50 mg/ml-delta-9-THC v extrakčním roztoku.
c) Pokusné podmínky
Jako příklad pro kolonu uvedenou v bodu a) se uvádějí tyto podmínky:
- teplota v peci 260
°C,
- teplota vstřikovače 300 °C,
- teplota detektoru 300 °C.
d) Vstříknutý objem: 1 μl
4. Výsledky
Výsledky se vyjadřují na dvě desetinná místa v gramech
delta-9-THC na 100 gramů
analytického vzorku vysušeného na stálou hmotnost. Použije se přípustná
odchylka 0,03 g
na 100 g.
- Postup A: jedno stanovení na jeden zkušební vzorek.
Pokud je však získaný výsledek nad mezní hodnotou stanovenou v čl.
39 odst. 1 nařízení (ES) č. 73/2009, provede se druhé stanovení na analytický
vzorek a jako výsledek se vezme střední hodnota obou měření.
- Postup B: výsledek odpovídá střední hodnotě ze dvou měření na
zkušební vzorek.